蛋白穩定性分析儀

結合微量差示掃描熒光nanoDSF (nano Differential Scanning Fluorimetry）技術、動態光散射DLS (Dynamic Light Scattering)技術、靜態光散射SLS(Static Light Scattering)技術以及背反射（Backreflection）技術，實現了在整個熱升溫過程中，【同時且實時地】檢測樣品構象、粒徑和聚集變化，實現對生物制劑高分辨率的、結構域的穩定性表征，監測整個生物制劑研發流程中的關鍵環節，加速生物藥開發進程。

生物制品的開發過程漫長而復雜，從候選分子到最終變成產品都需要檢測一系列重要參數作為支持。從上游篩選、構建或改造候選分子，到制劑優化、可開發性評估，以及下游生產工藝優化，PR Panta 都可以始終如一地為候選分子提供全面的參數穩定性表征和可信賴的結果，精準比較不同團隊和不同批次樣品的構象與膠體穩定性數據時保持一致性。

產品優勢：

【同時且實時】：實現在整個升溫過程中實時監測和記錄，同時提供構象穩定性、粒徑及聚集數據，并在結構域水平上獲得全面且完整的穩定性信息；

【超高分辨率】：誤差值在±0.008的高分辨率，檢測多個熱變性時可有效區分具有相似Tm的結構域，彌補由于監測技術瓶頸而忽略掉的關鍵信息；

【高特異性】：可有效區分生物制劑信號與緩沖液或細胞間質信號；

【數據精準、重復性好】：Tm誤差范圍僅為±0.1 °C，提供真實的檢測結果；

【通量靈活、操作簡便】：無論是上游制劑開發還是下游工藝優化，無論濃度高低，一臺Panta即可滿足整個流程的穩定性檢測需求，節約成本和時間。

實體參數：

可以讓您在單次運行中測量熱穩定性，聚集，粒徑大小和分散性 - 無標記檢測，僅需使用微量樣品。依靠 Prometheus 獲得可靠的、高分辨率的蛋白質穩定性數據，檢測出不易被發現的穩定性行為， 讓您對目標最佳候選分子和條件都更加充滿信心。

 • 超高分辨率的生物物理檢測方法：通過了解影響蛋白穩定性的溫度和化學條件，對蛋白功能進行更深入的剖析，從而全面了解蛋白質的折疊特性和結構域。使用 PR 系列蛋白穩定性分析儀，輕松改善蛋白純化工作流程，快速排查各種生物制劑功能研究中的問題。

 • 全面檢測：快速測定不同緩沖液、鹽濃度、pH 和離子對蛋白質熱變性的影響。確定不同批次實驗之間的相似性。

 • 優化儲存和制劑條件：精確測定不同貯藏條件對蛋白質穩定性的影響。確定最佳制劑條件，確保蛋白穩定性。

 • 預測聚集：輕松預測蛋白聚集趨勢，更全面地了解影響蛋白質穩定性的各類因素。

1. 技術優勢

（1）天然條件下檢測：無需添加染料或改變樣品緩沖液。可檢測粘稠樣品。

（2）樣品準備：樣品直接吸入毛細管，上樣極簡單。

（3）數據精準：高密度的數據點意味著高質量的數據，其他技術遺漏的細節我們卻可以得到。

（4）同步測量：同步得到 T_m、T_onset 和 T_turbidity 等多個實驗結果。

（5）樣品消耗少：10 μL 樣品量 ，濃度 5 μg/mL 即可檢測。

（6）檢測更多條件：一次測試得到多個參數，使您更快獲得結果。

（7）通量選擇自由：靈活的樣品數量，一次實驗可做 1 個、48個或任意數量的樣品，也可以選擇全自動上樣。

2. 技術原理

（1）微量差示掃描熒光技術 (nanoDSF)

PR 系列基于微量差示掃描熒光技術 (nanoDSF) 技術，可在天然條件下檢測蛋白熱變性和化學變性。蛋白中色AN酸和LUO氨酸的熒光與其所處的環境密切相關。免標記的 nanoDSF 技術可以準確檢測蛋白熱變性和化學變性過程中內源熒光的變化。因此，通過檢測熒光變化，可實現在非標記環境下測定蛋白的熱穩定性或化學穩定性。更重要的是，數據質量不會受樣品聚集影響。高質量的數據助您做出更好的決定。

PR 系列是通過檢測蛋白的內源性熒光來跟蹤其折疊狀態。熒光信號的比值會隨著溫度的增加或化學變性劑濃度的增加 而變化，從而測定蛋白穩定性參數 T_m 值。

（2）背反射技術（Backreflection）

NanoTemper 公司研發的背反射光學模塊主要用于檢測蛋白的聚集現象。 蛋白的聚集檢測主要基于顆粒的光散射效應。歸功于 PR 系列產品使用的高精度毛細管和自動化的內部參比，聚集檢測的重復性和靈敏性均優于傳統方式。同時，由雙通道 UV (Dual - UV Technologies) 檢測模塊獲得的高密度數據能夠同步監測蛋白的去折疊過程。熱穩定性和聚集起始溫度的同步檢測，能非常快速的給您夠提供精確、信息全面的蛋白穩定性分析數據。

（3）動態光散射技術（DLS）

用于檢測水力學半徑，均一性以及自相互作用 K_D 

圖 1：激光 (紫色虛線) 被溶液中的粒子所散射，散射光（紫色波浪線）被用于檢測粒子的布朗運動。 

圖 2 ：儀器采集散射光強度隨時間的波動，較小的粒子擴散得更快，導致波動強度比較大的粒子更大。因此， 散射光強度的波動可用于提取擴散系數和計算粒子尺寸。 

圖 3：自相關函數描述了一個粒子在一段時間內在同一位置被發現的概率 (用 Tau 表示 )。當較大的粒子經 歷較慢的布朗運動時，它們的自相關函數經歷較慢的衰減，而較小、較快的粒子的自相關函數衰減得更快。 

圖 4：擬合自相關函數來確定擴散系數 D，并代入 Stokes-Einstein 方程。該方程與粒子的大小 (半徑) 和擴 散系數有關，由此可以確定溶液中粒子的大小。

（4）靜態光散射技術（SLS）

與動態光散射不同，靜態光散射檢測的是溶液中所有粒子的平均散射光強度 , 計算樣品的分子量以及第二維里系數 B₂₂。

3. 簡單、靈活的分析軟件

Prometheus Panta 配備了 Panta Control，Panta AutoControl 及 Panta Analysis 三個軟件，助您輕松完成多參數蛋白穩定性分析。您可通過 Panta Control 軟件在一次升溫過程中同時且實時檢測樣品的T_m 、T_onset、T_turbidity、T_size 和 T_scattering，單獨運行光散射模塊進行自相互作用分析，通過化學變性實驗檢測樣品去折疊的自由能 ΔG 或進 行加速實驗。Panta AutoControl 軟件可幫您完成 1356 個樣品的自動化篩選。Panta Analysis 軟件可進行重復樣品的統計分析以及數據疊加呈現。您可自定義所需呈現的檢測參數，設定模板進行標準化分析并批量導出數據。

4. 典型應用

（1）抗體可開發性評估

（2）可比性研究

（3）多參數高通量制劑篩選

（4）化學變性實驗

（5）高濃度樣品聚集預測-DLS

（6）高濃度樣品聚集預測-SLS

（7）片段化合物庫篩選

（8）結合分枝桿菌延伸因子藥物篩選

（9）蛋白液 - 液相分離藥物開發

（10）核苷酸糖轉運蛋白底物調控機制

（11）酶庫高通量篩選

（12）高通量膜蛋白去垢劑篩選